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Qiagen | therascreen® EGFR RGQ PCR Kit – FDA

therascreen® EGFR RGQ PCR Kit – FDA

 

 
 
    • El kit therascreen EGFR RGQ PCR es un kit listo para usar,  ha sido diseñado para la detección de las 29 mutaciones somáticas en el oncogén EGFR mediante una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en el instrumento Rotor-Gene Q. Con ayuda de las tecnologías Scorpions y ARMS®
    • El kit therascreen EGFR RGQ PCR permite detectar las siguientes mutaciones:
19 deleciones del exón 19
(detecta la presencia de   cualquiera de las19 deleciones pero no distingue entre las mismas)
T790M
L858R
L861Q
G719X
(detecta la presencia de G719S, G719A o G719C, pero no permite distinguir entre las mismas.

S768I

3 inserciones en el exón 20
(detecta la presencia de  cualquiera de las 3 inserciones pero no distingue entre las mismas)
 
Los métodos que se utilizan en este kit son altamente selectivos y, en función del volumen total de ADN presente, permiten detectar un bajo porcentaje de mutaciones en ADN genómico normal. Los límites de selectividad y detección son superiores a los de otras tecnologías tales como la de secuenciación mediante terminadores fluorescentes
 
 

Principio

El kit therascreen EGFR RGQ PCR combina las tecnologías ARMS y Scorpions
para detectar mutaciones de PCR en tiempo real.

  • ARMS: La tecnología ARMS permite llevar a cabo una amplificación específica de los
    alelos o las mutaciones.
    La enzima Taq ADN polimerasa (Taq) resulta eficaz para diferenciar entre una
    coincidencia y un error de coincidencia en el extremo 3’ de un primer o
    cebador de PCR. Algunas secuencias mutadas se amplifican de forma selectiva,
    incluso en muestras cuya mayoría de secuencias no presentan la mutación.
  • Scorpions: La detección de la amplificación se realiza mediante la tecnología Scorpions.
    La tecnología Scorpions utiliza moléculas bifuncionales que contienen un
    cebador de PCR unido covalentemente a una sonda. El fluoróforo de esta
    sonda interactúa con un quencher o silenciador, también incorporado en la
    sonda, lo cual reduce la fluorescencia. Durante la reacción de la PCR, cuando
    la sonda se une al amplicón, se separan el fluoróforo y el silenciador. El
    resultado es un aumento de la fluorescencia en el tubo de reacción.
 

Procedimiento

El kit therascreen EGFR RGQ PCR incluye un procedimiento de dos pasos. El
primer paso se basa en el rendimiento del ensayo de control para valorar el
ADN total de una muestra. El segundo paso consiste en completar el ensayo de
mutación para determinar la presencia o ausencia de ADN mutado.
 
Consultas y asesoramiento info@tecnolab.com.ar